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蛋白质组学

      

      胶条鉴定是指利用LC-ESI-MS/MS蛋白鉴定技术对胶条样本(即SDS-PAGE样本)、IP、co-IP(western blot)、Pull-down等纯化溶液等中的复杂样本进行生物质谱鉴定。
胶条鉴定技术原理

       电喷雾(ESI)技术是将待测分子溶解在溶剂中通过HPLC分离,以液相方式通过毛细管达到喷雾口,在喷雾口高压电场作用下形成带电荷的微滴,随着微滴中的挥发性溶剂蒸发,微滴表面的电荷体密度随半径减少而增加,达到某一临界点时,样品以离子化的方式从液滴表面蒸发,进入质量分析器。电喷雾离子化方式容易形成多电荷离子,因此在较小的M/Z范围内可检测到大分子质量的分子;
      采用液相方式进样,一般与液相色谱(LC)联用,可以对复杂样品进行质谱分析,根据样品在色谱中不同的保留时间对其进行分离后鉴定,可以明显提升质谱分析检测的效率和精确度。

胶条鉴定实验流程
 

应用领域
 
         蛋白质测序或者多肽质谱鉴定
 
胶条鉴定样品要求
 
         蛋白质溶液:浓度>0.1μg/μl,蛋白质总量 >5μg;

                     缓冲液不含去污剂NP40、Triton   X-100等

     SDS-PAGE条带:考染、银染(质谱兼容)条带清晰可见;
相关链接:  分子量检测       蛋白质谱服务     Westerb blot    iTRAQ服务


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